Pancreatic islet isolation by mechanical-enzymatic separation, stationary collagenase digestion and dextran discontinuous density gradient purification: experimental study in dogs
Waisberg, JaquesPrado Soares, HeloísaGustavo Altieri, LuísRamaciotti, OsírisBasilio Speranzini, Manlio
A perspectiva do alotransplante de ilhotas pancreáticas no homem está na dependência do desenvolvimento de métodos que propiciem quantidades suficientes de ilhotas pancreáticas, originadas de doador único, capazes de, quando transplantadas, levarem à normalização do metabolismo dos hidratos de carbono. Objetivo: Avaliar, em cães, a eficácia do isolamento das ilhotas de Langerhans por meio da técnica de separação mecânica-enzimática, digestão estacionária com colagenase e purificação pelo gradiente de densidade descontínua de dextran. Métodos: A contagem do número e avaliação do tamanho das ilhotas foi realizada pela coloração com difeniltiocarbazona e exame em microscópio estereoscópico munido de retícula ocular para medição do diâmetro médio das ilhotas coradas. Resultados: O número médio de ilhotas isoladas foi de 81032,20 ± 24736.79 e o número médio de ilhotas/kg de peso corpóreo foi de 6938,70± 1392,43. O número médio de ilhotas/kg de peso corpóreo obtido mostrou correlação significativa com peso corpóreo e peso do pâncreas extirpado. Conclusão: Estes resultados sugerem que o número de ilhotas isoladas, de um único doador, por meio da separação mecânica-enzimática, digestão estacionária com colagenase e purificação pelo gradiente de densidade descontínua de dextran pode ser suficiente para o sucesso do transplante de ilhotas pancreáticas em cães.
Texto completo