Detecção e identificação de mycobacterium bovis pela reação em cadeia da polimerase (pcr)
Sakamoto, S.M.Heinemann, M.B.Telles, M.A.S.Roxo, E.Richtzenhain, L.J.Vasconcellos, S.A.Ferreira Neto, J.S.
RESUMO Com o intuito de adaptar um método para detecção e identificação rápida do Mycobacterium bovis utilizando a reação ein cadeiá da polimerase (PCR), foram comparados dois métodos de extração do material genético e testados três pares de primers, um para detecção de Mycobacterium spp. (fragmento de 383 bp do gene da HSP 65 kD), um para o Complexo M. tuberculosis (fragmento de 419 bp do gene para Pab 38 kD) e um específico para M. bovis. O método de extração baseado em lise alcalina apresentou maior rendimento que o de digestão enzimática (p<0,001 ), porém com maior degradação do DNA. Os primers, aplicados em culturas puras, apresentaram resultados coerentes tanto para amostras padrão quantopara os isolamentos de campo identificadas pelos métodos tradicionais.
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