Infecção por Sarcocystis neurona, Toxoplasma gondii e Neospora caninum em fetos bovinos de um matadouro no Sul do Brasil
Roman, Isac JTagarra, Larissa GRodrigues, Fernando SCargnelutti, Juliana FSangioni, Luis AntonioVogel, Fernanda S. F
Este estudo tem como objetivo descrever a detecção molecular de Sarcocystis neurona, Toxoplasma gondii e Neospora caninum em amostras de cérebro obtidas de fetos bovinos em um matadouro no Sul do Brasil. Amostras de cérebro de 35 fetos de vacas gestantes assintomáticas foram submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR) aninhada para amplificar um fragmento do gene 18S rRNA específico para S. neurona, T. gondii e N. caninum. Os amplicons foram submetidos a um processo de digestão em duas etapas: primeiro, com a enzima de restrição DdeI, que diferencia N. caninum de T. gondii e S. neurona; e posteriormente, com a enzima HpaII, para distinguir S. neurona de T. gondii e N. caninum. Das 35 amostras de cérebro testadas, 26 apresentaram resultados positivos na PCR para o gene 18S rRNA. Destas, 23 foram digeridas com enzimas de restrição, resultando em 17 amostras positivas para S. neurona, cinco para N. caninum e uma para T. gondii. Primers específicos para S. neurona, N. caninum e T. gondii foram empregados para confirmar os resultados do polimorfismo de comprimento de fragmentos de restrição. Sequenciamento de DNA e análise filogenética, baseada na região ITS-1, foram realizados em uma amostra positiva para S. neurona, confirmando nossos resultados surpreendentes. A sequência do feto 75 apresentou uma alta identidade de nucleotídeos (97,79%) e se agrupou com sequências de S. neurona disponíveis no GenBank. As análises moleculares confirmaram a detecção inédita de S. neurona, um protozoário não anteriormente relatado em bovinos, em amostras de cérebro fetal bovino, destacando assim a necessidade de mais pesquisas sobre infecções por protozoários do filo Apicomplexa em bovinos.
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