Estudo comparativo de três diferentes corantes para avaliação da integridade física da membrana plasmática de espermatozoides bovinos criopreservado

Andre Belico Vasconcelos, João Pedro Brandão Zandonaide, Ana Luisa Fernandes Sobrinho, Breno Oliveira Silva, Amanda Pifano Neto Quintal

Resumo


O aspecto morfo-funcional da membrana plasmática facilita o transporte de nutrientes para o interior do espermatozoide, o que está ligado à integridade física da membrana plasmática. O presente trabalho objetivou comparar três diferentes corantes na avaliação da integridade física da membrana plasmática do espermatozoide bovino, pós-congelamento. Utilizando os corantes eosina 3% (p/v), azul de tripan 0,4% (p/v) e iodeto de propídio (1,5mM). Foram formados dois grupos para pesquisa. O primeiro, um ejaculado de cada 11 animais e um segundo grupo de dez ejaculados de um único animal. Foi realizada avaliação microscópica do sêmen fresco (motilidade total, motilidade progressiva, vigor e integridade da membrana plasmática). Das amostras congeladas foram avaliados todos os parâmetros descritos anteriormente, além da técnica de eosina, azul de tripan, e iodeto de propídio. Os resultados estão apresentados como média de porcentagem ± desvio padrão. Os valores para a integridade de membrana, utilizando os corantes eosina, azul de tripan, e iodeto de propídio, foram 56.8±8.3%; 56.1±7.9%; 54.6±9.1%, respectivamente. Não há diferença significativa entre os grupos (p≥0.001). Na análise comparativa das técnicas podemos observar que a citometria de fluxo, possibilita um número maior de avaliação celular, quando comparado à técnica de microscopia de campo claro, possibilitando uma menor variabilidade e maior rapidez na avaliação da amostra.


Palavras-chave


eosina; azul de tripan; iodeto de propídio

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